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病原学诊断隐孢子虫的方法

2019-09-12 09:43 医学教育网
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医学教育网与大家一起跟着大纲来复习!隐孢子虫的实验诊断是检验技士考试需要掌握的内容,医学教育网小编为大家整理汇总如下,希望可以帮助大家复习掌握。

粪便(水样或糊状便为好)直接涂片染色,检出卵囊即可确诊。有时呕吐物和痰也可作为受检标本。检查方法有:

(1)金胺—酚染色法:新鲜或甲醛固定后的标本均可用此法,染色后在荧光显微镜下观察。卵囊圆形呈明亮乳白—黄绿色荧光。低倍镜下为圆形小亮点,周边光滑,虫体数量多时可遍布视野,犹如夜空中繁星。高倍镜下卵囊壁薄,中央淡染,似环状。本法简便、敏感,适用于批量标本的过筛检查。

(2)改良抗酸染色法:染色后背景为蓝绿色,卵囊呈玫瑰色,圆形或椭圆形,囊壁薄,内部可见1~4个梭形或月牙形子孢子,有时尚可见棕色块状的残留体。但粪便标本中多存在红色抗酸颗粒,形同卵囊,难以鉴别。

(3)金胺酚—改良抗酸染色法:先用金胺—酚染色,再用改良抗酸染色复染,用光学显微镜检查,卵囊形态同抗酸染色所示,但非特异性颗粒呈蓝黑色,颜色与卵囊不同,有利于查找卵囊,优化了改良抗酸染色法,提高了检出率。

(4)基因检测:采用PCR和DNA探针技术检测隐孢子虫特异DNA,具有特异性强、敏感性高的特点。在PCR中使用相应的引物,可扩增出隐孢子虫DNA特异的452bp片段,其敏感性可达0.1pg水平。

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